NGHIÊN CỨU KỸ THUẬT NHÂN NUÔI IN VITRO TẾ BÀO SÂU KHOANG (Spodoptera litura) BƯỚC ĐẦU HƯỚNG TỚI SẢN XUẤT CHẾ PHẨM SINH HỌC TRỪ SÂU QUA CON ĐƯỜNG LÂY NHIỄM VI RÚT

Sau khi phân lập, các tế bào mô tiền phôi từ buồng trứng trưởng thành sâu khoang được nuôi duy trì liên tục trong môi trường dinh dưỡng. Sử dụng các kĩ thuật cơ bản để phân lập và nhân nuôi in vitro tế bào sâu khoang đã phân lập và nhân nuôi thành công dòng tế bào mã hiệu 2.tp., đây là tế bào tăng trưởng bám dính trên bề mặt của bình nuôi cấy. Tế bào sinh trưởng tăng gấp 20 lần số lượng sau khoảng 27 ngày nuôi cấy, hình thái tế bào phân chia đồng đều và sự tăng trưởng của tế bào ổn định ở lần cấy chuyển thứ 25 của nhân nuôi thứ cấp làm thuần tế bào. Kĩ thuật bảo quản tế bào ở nhiệt độ – 800 C đảm bảo mật độ tế bào ổn định sau 1 tháng. Sau bảo quản, cần phải đưa ra cấy chuyển phục hồi sức sống và khả năng phát triển sinh khối của tế bào sâu khoang. Môi trường nuôi cấy có vai trò quyết định đến sinh trưởng tế bào sâu khoang, nhiều môi trường được sản xuất đặc biệt dành cho bộ Lepidoptera. Nghiên cứu này cho thấy môi trường nhân nuôi in vitro thích hợp nhất với tế bào sâu khoang là môi trường Excell 420-14419C, sau 6 ngày nhân nuôi đạt tới 18,84 ˟ 109 tế bào/ml.

Embryonic cells from mature ovaries are maintained continuously in the nutrient medium. The success of Spodoptera litura cell culture by 2.tp established embryonic tissue cells. In primary culture, at the twenty seven days of culture, cell adhered on the surface of the culture vessel and the number was folded up  to  20 times. In subculture, the morphology of cells from embryo was rather stable at the 25th cultruring transfer. The new cells should be stored at – 800 C for up to one month. After storing, the cells need to be recovered by culturing and appropriate medium for culturing was Excell 420-14419C. In this medium, the density of cells was 18.84 ˟ 109 cells/ml.