ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ YẾU TỐ ĐẾN HIỆU QUẢ CHUYỂN GEN VÀO PHÔI HẠT NON GIỐNG LÚA BẮC THƠM SỐ 7 NHỜ Agrobacterium tumefaciens
ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT SỐ YẾU TỐ ĐẾN HIỆU QUẢ CHUYỂN GEN VÀO PHÔI HẠT NON GIỐNG LÚA BẮC THƠM SỐ 7 NHỜ Agrobacterium tumefaciens
Factors affecting Agrobacterium - mediated transformation efficiency of Bac thom 7 rice cultivars using immature embryos by Agrobacterium tumefaciens
Giống lúa Bắc thơm số 7 là một trong những giống lúa được trồng phổ biến ở các tỉnh phía Bắc của Việt Nam, được người tiêu dùng ưa chuộng. Quy trình chuyển gen vào BT7 cần được thiết lập để có thể ứng dụng được công nghệ chỉnh sửa hệ gen nhằm cải thiện và nâng cao chất lượng giống lúa này. Callus từ phôi hạt non có khả năng tái sinh chồi tốt hơn so với phôi già. Nghiên cứu này đã xác định được các yếu tố tuổi phôi, mật độ khuẩn, nồng độ acetosyringone và thời gian đồng nuôi cấy có ảnh hưởng đến hiệu quả quá trình chuyển gen vào phôi hạt non giống BT7. Kết quả cho thấy, tuổi phôi từ 11-13 DAP đồng nuôi cấy với dung dịch vi khuẩn A. tumefaciens có OD600nm = 0,3 trên môi trường có bổ sung 150 μM acetosyringone trong thời gian 5 ngày cho hiệu suất chuyển gen đạt 20,6%.
Bac thom 7 is one of the main rice varieties and favored in Vietnam. A rice-transformation protocol should be established in order to to apply the genome editing technology for improving the quality of BT7 rice cultivar. Callus from the immature embryos had better regeneration ability than the mature ones for the indica rice. In this study, some factors such as explant age, Agrobacterium density, acetosyringone concentration and length of co-cultivation days affecting efficiency of the genetic transformation for BT7 rice cultivar were determined. The results showed that the embryo age of 11-13 DAP co-cultured with a solution of A. tumefaciens with OD600nm = 0.3 on the medium supplemented with 150 μM acetosyringone for 5 days reached 20.56% of the transgenic efficiency.